如何才能準確的對水中葉綠素含量進行測量呢?
發布日期:2022-08-22 瀏覽次數:486
葉綠素(Chlorophyll)是植物光合作用中的重要光合色素,可分為a、b、c、d四類。葉綠素不溶于水,而溶于有機溶劑,如乙醇、丙酮、氯仿等;葉綠素不很穩定,光、酸、堿、氧、氧化劑等都會使其分解;葉綠素a分子式為C55H72O5N4Mg,酸性條件下,葉綠素a分子很容易失去卟啉環中的鎂成為脫鎂葉綠素;葉綠素a存在于所有的浮游植物中,大約占有機干重的1%~2%。葉綠素a本身對環境沒有危害,但它是估算水中浮游植物生物量的重要指標。如何才能準確的對水中葉綠素含量進行測量呢?
一、取新鮮植物葉片(或其它綠色組織)或干材料,擦凈組織表面污物,去除中脈剪碎。稱取剪碎的新鮮樣品2g,放入研缽中,加少量石英砂和碳酸鈣粉及3ml95%乙醇,研成均漿,再加乙醇10ml,繼續研磨至組織變白。靜置3~5min。取濾紙1張置于漏斗中,用乙醇濕潤,沿玻棒把提取液倒入漏斗,濾液流至100ml棕色容量瓶中;用少量乙醇沖洗研缽、研棒及殘渣數次,后連同殘渣一起倒入漏斗中。用滴管吸取乙醇,將濾紙上的葉綠體色素全部洗入容量瓶中。直至濾紙和殘渣中無綠色為止。后用乙醇定容至100ml,搖勻。取葉綠體色素提取液在波長665nm、645nm和652nm下測定吸光度,以95%乙醇為空白對照。
二、計算
按照實驗原理中提供的經驗公式,分別計算植物材料中葉綠素a、b和總葉綠素的含量。